Un flaconcino sigillato di peptide liofilizzato è una delle forme più stabili in cui può trovarsi una biomolecola. L'acqua, il mezzo in cui avviene la maggior parte delle reazioni di degradazione, è stata rimossa e la polvere si trova sotto un tappo e una ghiera sigillata. Ciò che riduce la durata di utilizzo di un flaconcino accade quasi sempre dopo la rottura del sigillo. Questa guida esamina i quattro fattori principali.
1. Acqua
Una volta che un peptide è in soluzione, idrolisi, deamidazione e ossidazione procedono a velocità che dipendono da temperatura, pH e sequenza. I residui di asparagina e glutammina subiscono deamidazione, metionina e cisteina si ossidano e i legami dell'aspartato possono scindersi. Lo stesso peptide che si conserva per anni come polvere può mostrare variazioni misurabili in poche settimane se in soluzione a temperatura ambiente. La conseguenza pratica: ricostituire solo la quantità che un protocollo richiede in un breve periodo e conservare il resto come polvere.
2. Temperatura
Ogni aumento di 10 °C raddoppia all'incirca la velocità della maggior parte delle reazioni di degradazione. La polvere sigillata si conserva al meglio a -20 °C per periodi prolungati; da 2 a 8 °C è accettabile per alcune settimane. La soluzione ricostituita va conservata in frigorifero da 2 a 8 °C. Congelare una soluzione è possibile, ma introduce il fattore successivo.
3. Cicli di congelamento e scongelamento
Quando una soluzione congela, si forma prima il ghiaccio e il liquido restante diventa sempre più concentrato in peptide e sali. Variazioni locali di pH e la formazione di cristalli di ghiaccio sottopongono la molecola a stress meccanico e chimico, e alcuni peptidi aggregano allo scongelamento. Un singolo ciclo di congelamento e scongelamento è di solito tollerabile, cicli ripetuti no. Se un flaconcino ricostituito deve essere congelato, lo suddivida prima in aliquote monouso, in modo che ogni porzione venga scongelata una sola volta.
4. Luce e ossigeno
Triptofano, tirosina e metionina sono sensibili alla luce e soggetti a ossidazione. Flaconcini ambrati o una scatola in frigorifero risolvono il problema della luce. L'ossigeno entra ogni volta che un ago attraversa il tappo: per questo conviene ridurre al minimo il numero di prelievi da un flaconcino e usare acqua batteriostatica, il cui conservante impedisce che un flaconcino multiprelievo diventi un terreno di coltura.
Un semplice protocollo di conservazione
Flaconcini sigillati: -20 °C, al buio, all'asciutto. Lasciare che il flaconcino raggiunga la temperatura ambiente prima di aprirlo, così che non si formi condensa sulla polvere fredda.
Ricostituito: da 2 a 8 °C, al buio, etichetta con data, da utilizzare entro il periodo definito dal Suo protocollo.
Se congelare una soluzione è inevitabile: prima aliquotare, poi congelare una volta e scongelare una volta.
Registrare per ogni flaconcino numero di lotto, data di ricostituzione e volume di solvente.
Le nostre domande frequenti riassumono le condizioni di conservazione per ogni prodotto dell'assortimento. Le temperature indicate sopra valgono per tutti i peptidi che forniamo.
Esclusivamente per uso di ricerca in laboratorio. Non costituisce indicazione di dosaggio né consulenza medica.