La question que l’on nous pose le plus souvent ne porte pas sur le composé mais sur le solvant : combien de millilitres d’eau bactériostatique faut-il mettre dans le flacon ? Il n’existe pas de réponse unique. Le volume fixe la concentration, et la concentration détermine si le volume que vous prélèverez ensuite par échantillon est facile à mesurer sur une seringue. Ce guide explique comment le choisir.
Le calcul
Trois valeurs interviennent : la quantité de peptide dans le flacon (mg), le volume de solvant (mL) et la quantité souhaitée par échantillon (µg). Divisez la première par la deuxième et vous obtenez la concentration en mg/mL. Divisez la quantité par échantillon par la concentration et vous obtenez le volume par échantillon. Sur une seringue à insuline U-100, une unité correspond à 0,01 mL : multipliez donc le volume en mL par 100 pour obtenir des unités.
Exemple : 10 mg dans 2 mL donnent 5 mg/mL. Un échantillon de 250 µg correspond à 0,25 mg, soit 0,05 mL à 5 mg/mL, c’est-à-dire 5 unités. Notre calculateur de peptides effectue ce calcul pour n’importe quelle combinaison.
Ce qui rend un volume pratique
Les très petits volumes sont difficiles à mesurer. En dessous de 2 unités, l’erreur de lecture d’une seringue représente une part importante de l’échantillon. Les très grands volumes posent le problème inverse : un flacon de 3 mL n’accepte pas 5 mL de solvant, et les prélèvements importants sont lents. Une plage pratique se situe entre 5 et 50 unités par échantillon. Si votre résultat sort de cette plage, modifiez le volume de solvant, pas l’échantillon.
Volumes types selon la taille du flacon
| Flacon | Solvant | Concentration | Échantillon de 250 µg |
|---|---|---|---|
| 5 mg | 1 mL | 5 mg/mL | 5 unités |
| 10 mg | 2 mL | 5 mg/mL | 5 unités |
| 10 mg | 1 mL | 10 mg/mL | 2,5 unités |
| 50 mg | 2 mL | 25 mg/mL | 1 unité (trop faible : utilisez des échantillons plus importants ou davantage de solvant) |
Les flacons à forte quantité, comme le GHK-Cu 50 mg ou l’Epitalon 100 mg, sont généralement reconstitués à une concentration plus élevée et prélevés en échantillons plus importants, ou partiellement reconstitués dans un second flacon. Les deux options sont légitimes, à condition que le cahier de laboratoire indique ce qui a été fait.
Contenance du flacon
La plupart des flacons en verre de 2 mL et 3 mL du marché de la recherche contiennent le volume indiqué plus un petit espace de tête. Ajouter plus d’environ 3 mL dans un petit flacon peut dépasser sa contenance. Si vous avez besoin d’une concentration plus faible, diluez une partie mesurée dans un second flacon stérile plutôt que de trop remplir le premier.
Technique
Ajoutez lentement le solvant le long de la paroi intérieure pour qu’il s’écoule sur la poudre, puis laissez reposer le flacon. Les peptides lyophilisés se dissolvent d’eux-mêmes en une ou deux minutes ; un mouvement circulaire doux est possible, agiter ne l’est pas. Les bulles d’air et la mousse signalent une contrainte mécanique susceptible d’altérer le peptide. Conservez le flacon reconstitué au réfrigérateur entre 2 et 8 °C et notez la date sur l’étiquette.
Exclusivement destiné à la recherche en laboratoire. Ce guide décrit la conversion d’unités et la manipulation pour le travail en laboratoire. Il ne constitue ni un conseil de dosage, ni un conseil médical.