Um frasco selado de péptido liofilizado é uma das formas mais estáveis que uma biomolécula pode assumir. A água, o meio em que decorre a maioria das reações de degradação, foi removida, e o pó fica protegido por uma rolha e uma cápsula cravada. O que encurta a vida útil de um frasco é quase sempre algo que acontece depois de o selo ser quebrado. Este guia analisa os quatro fatores principais.
1. Água
Assim que um péptido está em solução, a hidrólise, a desamidação e a oxidação avançam a velocidades que dependem da temperatura, do pH e da sequência. Os resíduos de asparagina e glutamina sofrem desamidação, a metionina e a cisteína oxidam-se e as ligações do aspartato podem quebrar-se. O mesmo péptido que se conserva durante anos em pó pode apresentar alterações mensuráveis em poucas semanas em solução à temperatura ambiente. A consequência prática: reconstitua apenas o que um protocolo necessita num curto período e mantenha o resto em pó.
2. Temperatura
Cada aumento de 10 °C duplica aproximadamente a velocidade da maioria das reações de degradação. O pó selado conserva-se melhor a -20 °C para armazenamento prolongado, sendo aceitáveis 2 a 8 °C durante semanas. A solução reconstituída deve ficar no frigorífico, entre 2 e 8 °C. É possível congelar uma solução, mas isso introduz o fator seguinte.
3. Ciclos de congelação e descongelação
Quando uma solução congela, forma-se primeiro gelo e o líquido restante fica cada vez mais concentrado em péptido e sais. As variações locais de pH e a formação de cristais de gelo submetem a molécula a stress mecânico e químico, e alguns péptidos agregam-se ao descongelar. Um único ciclo de congelação e descongelação é geralmente tolerável; ciclos repetidos não. Se for necessário congelar um frasco reconstituído, divida-o primeiro em alíquotas de utilização única, para que cada porção seja descongelada apenas uma vez.
4. Luz e oxigénio
O triptofano, a tirosina e a metionina são sensíveis à luz e propensos à oxidação. Frascos âmbar ou uma caixa no frigorífico resolvem o problema da luz. O oxigénio entra sempre que uma agulha atravessa a rolha, o que é uma das razões para reduzir ao mínimo o número de extrações de um frasco e para utilizar água bacteriostática, cujo conservante impede que um frasco de várias extrações se transforme num meio de cultura.
Um protocolo de armazenamento simples
Frascos selados: -20 °C, ao abrigo da luz, em local seco. Deixe o frasco atingir a temperatura ambiente antes de o abrir, para que não se forme condensação sobre o pó frio.
Reconstituídos: 2 a 8 °C, ao abrigo da luz, rótulo com data, utilizados dentro do período definido pelo seu protocolo.
Se for inevitável congelar uma solução: primeiro fazer alíquotas, congelar uma vez, descongelar uma vez.
Registe o número de lote, a data de reconstituição e o volume de solvente de cada frasco.
As nossas perguntas frequentes resumem as condições de armazenamento de todos os produtos da gama. As temperaturas acima aplicam-se a todos os péptidos que fornecemos.
Exclusivamente para uso em investigação laboratorial. Não constitui indicação de dosagem nem aconselhamento médico.