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Quanta água bacteriostática por frasco? Volumes de reconstituição explicados

A pergunta que mais recebemos não é sobre o composto, mas sobre o solvente: quantos mililitros de água bacteriostática devem ser adicionados ao frasco? Não existe uma única resposta certa. O volume define a concentração, e a concentração determina se o volume que depois aspira por amostra é fácil de medir numa seringa. Este guia mostra como o escolher.

As contas

Entram três valores: a quantidade de péptido no frasco (mg), o volume de solvente (mL) e a quantidade pretendida por amostra (µg). Divida o primeiro pelo segundo e obtém a concentração em mg/mL. Divida a quantidade por amostra pela concentração e obtém o volume por amostra. Numa seringa de insulina U-100, uma unidade corresponde a 0,01 mL, por isso multiplique o volume em mL por 100 para obter unidades.

Exemplo: 10 mg em 2 mL dão 5 mg/mL. Uma amostra de 250 µg corresponde a 0,25 mg, o que, a 5 mg/mL, equivale a 0,05 mL, ou 5 unidades. A nossa calculadora de péptidos faz este cálculo para qualquer combinação.

O que torna um volume fácil de medir

Volumes muito pequenos são difíceis de medir. Abaixo de 2 unidades, o erro de uma seringa passa a representar uma fração grande da amostra. Volumes muito grandes têm o problema inverso: um frasco de 3 mL não comporta 5 mL de solvente, e as extrações grandes são lentas. Um intervalo prático é de 5 a 50 unidades por amostra. Se o seu resultado ficar fora deste intervalo, altere o volume de solvente, não a amostra.

Volumes habituais por tamanho de frasco

Frasco Solvente Concentração Amostra de 250 µg
5 mg 1 mL 5 mg/mL 5 unidades
10 mg 2 mL 5 mg/mL 5 unidades
10 mg 1 mL 10 mg/mL 2,5 unidades
50 mg 2 mL 25 mg/mL 1 unidade (demasiado pequena; use amostras maiores ou mais solvente)

Os frascos com grandes quantidades, como o GHK-Cu de 50 mg ou o Epitalon de 100 mg, são normalmente reconstituídos a uma concentração mais elevada e aspirados em amostras maiores, ou parcialmente reconstituídos num segundo frasco. Ambas as opções são legítimas, desde que o registo indique o que foi feito.

Capacidade do frasco

A maioria dos frascos de vidro de 2 mL e 3 mL do mercado de investigação comporta o volume indicado mais um pequeno espaço livre. Adicionar mais de cerca de 3 mL a um frasco pequeno pode exceder a sua capacidade. Se precisar de uma concentração mais baixa, dilua uma porção medida num segundo frasco estéril em vez de encher demasiado o primeiro.

Técnica

Adicione o solvente lentamente pela parede interior, para que escorra até ao pó, e deixe o frasco repousar. Os péptidos liofilizados dissolvem-se sozinhos em um ou dois minutos; rodar suavemente é aceitável, agitar não. Bolhas de ar e espuma indicam stress mecânico que pode afetar o péptido. Mantenha o frasco reconstituído refrigerado entre 2 e 8 °C e anote a data no rótulo.

Exclusivamente para uso em investigação laboratorial. Este guia descreve a conversão de unidades e o manuseamento para trabalho laboratorial. Não constitui indicação de dosagem nem aconselhamento médico.